【標(biāo) 題】：兒童毛發(fā)中微量元素測(cè)定方法學(xué)的研究
【作者單位】：山東濟(jì)寧東盛電子儀器有限公司
【內(nèi)容摘要】： Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 是人體生理活動(dòng)所必需的微量元素，微量元素分析儀對(duì)維持肌體正常代謝、促進(jìn)兒童生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能等方面起著重要的作用。肌體微量元素的缺乏可引起一系列生化紊亂，生長(zhǎng)發(fā)育、免疫過程、細(xì)胞分裂、智力發(fā)育等均受到干擾，出現(xiàn)很多病理變化及各種疾病。準(zhǔn)確測(cè)定頭發(fā)中的微量元素含量均有助于很多疾病的診斷、治療、預(yù)后估計(jì)、療效觀察，以及闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)理，從而為預(yù)防這些疾病提供新的方法和措施。本研究通過對(duì)原子吸收分光光度法測(cè)定健康兒童頭發(fā)中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 吸光度的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，旨在分析原子吸收分光光度法測(cè)定兒童頭發(fā)中微量元素的可行性和穩(wěn)定性。 1.儀器
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Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 是人體生理活動(dòng)所必需的微量元素，微量元素分析儀對(duì)維持肌體正常代謝、促進(jìn)兒童生長(zhǎng)發(fā)育、增強(qiáng)免疫功能等方面起著重要的作用。肌體微量元素的缺乏可引起一系列生化紊亂，生長(zhǎng)發(fā)育、免疫過程、細(xì)胞分裂、智力發(fā)育等均受到干擾，出現(xiàn)很多病理變化及各種疾病。準(zhǔn)確測(cè)定頭發(fā)中的微量元素含量均有助于很多疾病的診斷、治療、預(yù)后估計(jì)、療效觀察，以及闡明某些疾病的發(fā)病機(jī)理，從而為預(yù)防這些疾病提供新的方法和措施。本研究通過對(duì)原子吸收分光光度法測(cè)定健康兒童頭發(fā)中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 吸光度的相關(guān)實(shí)驗(yàn)，旨在分析原子吸收分光光度法測(cè)定兒童頭發(fā)中微量元素的可行性和穩(wěn)定性。 1.儀器與試劑 1.1 儀器 TAS-990 原子吸收分光光度計(jì) LWP-500 型微量移液器 1.2 試劑 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標(biāo)準(zhǔn)溶液（1mg/ml）各一份，硝酸（優(yōu)級(jí)純）；雙氧水（優(yōu)級(jí)純）。 2.樣品 采用隨機(jī)抽樣的方法抽取自愿接受微量元素檢測(cè)的 3~7歲健康兒童 90 名，用不銹鋼剪從每個(gè)研究對(duì)象頭枕部發(fā)根處各剪取不帶發(fā)囊的頭發(fā)約 2g，分別裝入取樣袋內(nèi)，以待檢測(cè)。 3.測(cè)定方法 樣品預(yù)先經(jīng)過硝酸 - 雙氧水處理后，采用原子吸收分光光度計(jì)測(cè)定 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 元素的吸光度值。 3.1 樣品的預(yù)處理 將每份發(fā)樣預(yù)先使用洗滌劑浸泡，用蒸餾水沖洗后，再使用去離子水反復(fù)沖洗，于 60℃在烘箱中干燥 3 小時(shí)。從每份干燥后的發(fā)樣中各準(zhǔn)確稱取 0.5 克樣品，置于 100ml 的燒杯中，加入硝酸 - 雙氧水（HNO3：H2O2=1：1）50ml，小火加熱至近干并使之完全消化、冷卻，用 2%硝酸溶液溶解稀釋，轉(zhuǎn)移至 10ml 的容量瓶中，定容待測(cè)。 3.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 精密量取 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標(biāo)準(zhǔn)溶液 1ml 于 10ml 容量瓶中，各加 2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，稀釋成 100μg/ml 的標(biāo)準(zhǔn)液。再分別精密量取 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml 經(jīng)上述稀釋過的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標(biāo)準(zhǔn)溶液于 10mL 容量瓶中，并各加2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，放置待測(cè)。 4.統(tǒng)計(jì)方法 采用 SPSS 13．0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料晝夜微量元素平均含量，比較用 t 檢驗(yàn)。 5.結(jié)果 5.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性關(guān)系 取預(yù)先配制好的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標(biāo)準(zhǔn)溶液，測(cè)定各自吸光度與濃度關(guān)系，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，分別如下圖。 5.2 精密度試驗(yàn) 取預(yù)處理后樣品 10 份，按照上述方法消化后，在與繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線相同的條件下測(cè)定每一樣品發(fā)樣中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種元素的的濃度，計(jì)算平均值和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差，見表 1。 5.3 加樣回收率試驗(yàn) 取預(yù)處理后樣品 10 份，其中 5 份分別加入定量的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種微量元素標(biāo)準(zhǔn)液，分別測(cè)定其中微量元素含量，數(shù)據(jù)見表 2。5.4 晝夜差異分析取預(yù)處理后樣品 5 份，每份樣品分別在晝夜測(cè)定微量元素的含量，連續(xù)測(cè)定 3 日，分析晝夜條件對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響，數(shù)據(jù)見表 3。上述數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理，結(jié)果表明被測(cè)樣本經(jīng)上述處理后較為穩(wěn)定，晝夜差異分析無(wú)顯著性差異（P＞0.05）。 6.討論 目前，國(guó)內(nèi)學(xué)者對(duì)人頭發(fā)微量元素的研究較多，但對(duì)頭發(fā)中微量元素的測(cè)定方法研究開展不多，尤其是對(duì)采用原子吸收分光光度法測(cè)定兒童發(fā)樣中微量元素的研究報(bào)道更為少見。有文獻(xiàn)報(bào)道采用原子吸收法測(cè)定微量元素，具有快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)研究采用原子吸收分光光度法測(cè)定 90 例自愿接受檢測(cè)的 3~7 歲健康兒童頭發(fā)中的微量元素，探討該方法測(cè)定頭發(fā)微量元素的可行性及穩(wěn)定性。實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，原子吸收分光光度法測(cè)定微量元素其吸光度和濃度成正相關(guān)，線性依存關(guān)系較好，由精密度和回收率試驗(yàn)證明采用該方法進(jìn)行微量元素測(cè)量試驗(yàn)的系統(tǒng)誤差和偶然誤差發(fā)生率較低，試驗(yàn)過程中受外界因素干擾較小，實(shí)驗(yàn)室環(huán)境以及儀器工作條件穩(wěn)定，儀器操作、試液配制等正確可行。通過晝夜差異分析可知，采用原子吸收分光光度法進(jìn)行發(fā)樣中微量元素測(cè)量，實(shí)驗(yàn)過程不受時(shí)間影響，在不同的時(shí)間段本試驗(yàn)均進(jìn)展順利。本研究不僅確定了原子吸收分光光度法在不同環(huán)境下進(jìn)行兒童頭發(fā)中微量元素檢測(cè)是切實(shí)可行的，監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確，測(cè)定條件穩(wěn)定可靠，而且為今后關(guān)于頭發(fā)微量元素測(cè)定的相關(guān)課題及其他同類實(shí)驗(yàn)研究提供參考。
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極譜儀，極譜分析儀
