兒童毛發(fā)中微量元素測定方法學的研究

1.儀器與試劑

1.1 儀器

TAS-990 原子吸收分光光度計 LWP-500 型微量移液器

1.2 試劑

Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液（1mg/ml）各一份，硝酸（優(yōu)級純）；雙氧水（優(yōu)級純）。

2.樣品

采用隨機抽樣的方法抽取自愿接受微量元素檢測的 3~7歲健康兒童 90 名，用不銹鋼剪從每個研究對象頭枕部發(fā)根處各剪取不帶發(fā)囊的頭發(fā)約 2g，分別裝入取樣袋內(nèi)，以待檢測。

3.測定方法

樣品預先經(jīng)過硝酸 - 雙氧水處理后，采用原子吸收分光光度計測定 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 元素的吸光度值。

3.1 樣品的預處理

將每份發(fā)樣預先使用洗滌劑浸泡，用蒸餾水沖洗后，再使用去離子水反復沖洗，于 60℃在烘箱中干燥 3 小時。從每份干燥后的發(fā)樣中各準確稱取 0.5 克樣品，置于 100ml 的燒杯中，加入硝酸 - 雙氧水（HNO3：H2O2=1：1）50ml，小火加熱至近干并使之完全消化、冷卻，用 2%硝酸溶液溶解稀釋，轉(zhuǎn)移至 10ml 的容量瓶中，定容待測。

3.2 標準曲線的繪制

精密量取 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液 1ml 于 10ml 容量瓶中，各加 2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，稀釋成 100μg/ml 的標準液。再分別精密量取 0.20、0.40、0.60、0.80、1.00ml 經(jīng)上述稀釋過的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液于 10mL 容量瓶中，并各加2%硝酸溶液稀釋至 10ml，定容，搖勻，放置待測。

4.統(tǒng)計方法

采用 SPSS 13．0 統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料晝夜微量元素平均含量，比較用 t 檢驗。

5.結(jié)果

5.1 標準曲線的線性關系

取預先配制好的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 標準溶液，測定各自吸光度與濃度關系，繪制標準曲線，分別如下圖。

5.2 精密度試驗

取預處理后樣品 10 份，按照上述方法消化后，在與繪制標準曲線相同的條件下測定每一樣品發(fā)樣中 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種元素的的濃度，計算平均值和相對標準偏差，見表 1。

5.3 加樣回收率試驗

取預處理后樣品 10 份，其中 5 份分別加入定量的 Fe、Cu、Mg、Zn、Ca 五種微量元素標準液，分別測定其中微量元素含量，數(shù)據(jù)見表 2。5.4 晝夜差異分析取預處理后樣品 5 份，每份樣品分別在晝夜測定微量元素的含量，連續(xù)測定 3 日，分析晝夜條件對測定結(jié)果的影響，數(shù)據(jù)見表 3。上述數(shù)據(jù)經(jīng)統(tǒng)計學軟件處理，結(jié)果表明被測樣本經(jīng)上述處理后較為穩(wěn)定，晝夜差異分析無顯著性差異（P＞0.05）。

6.討論

目前，國內(nèi)學者對人頭發(fā)微量元素的研究較多，但對頭發(fā)中微量元素的測定方法研究開展不多，尤其是對采用原子吸收分光光度法測定兒童發(fā)樣中微量元素的研究報道更為少見。有文獻報道采用原子吸收法測定微量元素，具有快速、簡便、準確等優(yōu)點。本實驗研究采用原子吸收分光光度法測定 90 例自愿接受檢測的 3~7 歲健康兒童頭發(fā)中的微量元素，探討該方法測定頭發(fā)微量元素的可行性及穩(wěn)定性。實驗研究結(jié)果表明，原子吸收分光光度法測定微量元素其吸光度和濃度成正相關，線性依存關系較好，由精密度和回收率試驗證明采用該方法進行微量元素測量試驗的系統(tǒng)誤差和偶然誤差發(fā)生率較低，試驗過程中受外界因素干擾較小，實驗室環(huán)境以及儀器工作條件穩(wěn)定，儀器操作、試液配制等正確可行。通過晝夜差異分析可知，采用原子吸收分光光度法進行發(fā)樣中微量元素測量，實驗過程不受時間影響，在不同的時間段本試驗均進展順利。本研究不僅確定了原子吸收分光光度法在不同環(huán)境下進行兒童頭發(fā)中微量元素檢測是切實可行的，監(jiān)測數(shù)據(jù)準確，測定條件穩(wěn)定可靠，而且為今后關于頭發(fā)微量元素測定的相關課題及其他同類實驗研究提供參考。

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